飼料-粗纖維含量的測(cè)定-重量法
一 范圍
本方法規(guī)定了飼料中粗纖維含量的測(cè)定。
本方法適用于各種混合飼料、配合飼料、濃縮飼料及單一飼料。
二 引用標(biāo)準(zhǔn)
GB/T601 化學(xué)試劑滴定分析用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
三 原理
用濃度準(zhǔn)確的酸和堿，在特定條件下消煮樣品，再用乙醇除去可溶物，經(jīng)高溫灼燒扣除礦物質(zhì)的量， 所余量為粗纖維。它不是一個(gè)確切的化學(xué)實(shí)體，只是在公認(rèn)強(qiáng)制規(guī)定的條件下測(cè)出的概略成分，其中以纖維素為主，還有少量半纖維素和木質(zhì)素。
四 試劑
分析中，除另有說(shuō)明外，僅使用分析純的試劑和蒸餾水或與其純度相當(dāng)?shù)乃?
4.1 硫酸溶液，0.128 0.005mol/L
4.1.1 配制
量取7.68mL 硫酸，緩緩注入1000mL，冷卻，搖勻。
4.1.2 標(biāo)定
4.1.2.1 測(cè)定方法
稱取0.5g270 ～300℃灼燒至恒重的基準(zhǔn)無(wú)水碳酸鈉，稱準(zhǔn)至0.0001g。溶于50mL 水中，加10 滴甲酚綠-甲基紅混合指示液，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液由綠色變?yōu)榘导t色，煮沸2min，冷卻后繼續(xù)滴定至溶液再呈暗紅色。同時(shí)作空白試驗(yàn)。母豬產(chǎn)床
4.1.2.2 計(jì)算
硫酸溶液濃度按下式計(jì)算：
C（1/2H2SO4）=m/（V1-V2）0.05299
式中：
c --硫酸溶液的物質(zhì)的量濃度，mol/L;
m--無(wú)水碳酸鈉的質(zhì)量，g;
V1--硫酸溶液的用量，mL;
V2--空白試驗(yàn)硫酸溶液的用量，mL;
0.05299--與1.00mL 硫酸溶液[C（1/2H2SO4） =1.000mol/L]相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜臒o(wú)水碳酸鈉的質(zhì)量。
4.2 氫氧化鈉溶液，0.313 0.005mol/L
4.2.1 配制
稱取約12.5g 氫氧化鈉，注入1000mL 無(wú)水二氧化碳的水中，搖勻。
4.2.2 標(biāo)定
4.2.2.1 測(cè)定方法
稱取1.8g105～110℃灼燒至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀，稱準(zhǔn)至0.0001g。溶于80mL 水中，加2 滴10g/L 酚酞指示液，用配制好的氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈粉紅色，同時(shí)作空白試驗(yàn)。
4.2.2.2 計(jì)算
氫氧化鈉溶液濃度按下式計(jì)算：
C（NaOH）=m/（V1-V2）0.2042
式中：c--氫氧化鈉溶液的物質(zhì)的量濃度，mol/L;
m--鄰苯二甲酸氫鉀的用量，g;
V1--氫氧化鈉溶液的用量，mL;
V2--空白試驗(yàn)氫氧化鈉溶液的用量，mL;
0.2042--與1.00mL 氫氧化鈉溶液[C（NaOH）=1.000mol/L]相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜泥彵蕉姿釟溻浀馁|(zhì)量。
4.3 酸洗石棉
4.4 95%乙醇
4.5 乙醚
4.6 正辛醇（防泡劑）
五 儀器設(shè)備
5.1 實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)。
5.2 分樣篩，孔徑1mm（18 目）。
5.3 分析天平，感量。0.0001g。
5.4 電加熱器（電爐）可調(diào)節(jié)溫度。
5.5 電熱恒溫箱（烘箱），可控制溫度在130℃。
5.6 高溫爐，有高溫計(jì)可控制溫度在500～600℃。
5.7 消煮器，有冷凝球的600mL 高型燒杯或有冷凝管的錐形瓶。
5.8 抽濾裝置，抽真空裝置，吸濾瓶和漏斗。（濾器使用0.071mm（200 目）不銹鋼網(wǎng)或尼龍濾布）。
5.9 古氏坩堝，30mL，預(yù)先加入酸洗石棉懸浮液30mL（內(nèi)含酸洗石棉0.2～0.3g）再抽干，以石棉厚度均勻， 不透光為宜。上下鋪兩層玻璃纖維有助于過(guò)濾。
5.10 干燥器，以氯化鈣或變色硅膠為干燥劑。
5.11 粗纖維測(cè)定儀器
國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)的符合本標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定原理，且測(cè)定結(jié)果一致的儀器。
六 試樣制備
將樣品用四分法縮減至200g，粉碎，全部通過(guò)1mm（18 目）篩，放入密封容器。
七 操作步驟
7.1 仲裁法
稱取1～2g 試料，精確至0.0002g，用乙醚脫脂，（含脂肪大于10%必須脫脂，含脂肪不大于10%，可不脫脂），放入消煮器，加200mL 已沸騰的硫酸溶液（0.128 0.005mol/L）和1 滴正辛醇，立即加熱，應(yīng)使其在2min 內(nèi)沸騰，調(diào)整加熱器，使溶液保持微沸，且連續(xù)微沸30min，注意保持硫酸濃度不變。試樣不應(yīng)離開(kāi)溶液沾到瓶壁上。隨后抽濾，殘?jiān)梅姓麴s水洗至中性后抽干。用已沸騰的氫氧化鈉溶液（0.313 0.005mol/L）將殘?jiān)D(zhuǎn)移至原容器中并加至200mL，同樣準(zhǔn)確微沸30min，立即在鋪有石棉的古氏坩堝上過(guò)濾，先用25mL 硫酸溶液（0.128 0.005mol/L）洗滌，殘?jiān)鼰o(wú)損失地轉(zhuǎn)移至坩堝中，用沸蒸餾水洗至中性，再用15mL 乙醇洗滌，抽干。將坩堝放入烘箱，于130 2℃下烘干2h，取出后在干燥器中冷卻至室溫，稱量，再于550 25℃高溫爐中灼燒30min，取出后于干燥器中冷卻至室溫后稱量。母豬產(chǎn)床
7.2 推薦法稱1～2g 試料（脫脂步驟同手工方法）于G2 玻璃沙漏斗中，用坩堝夾將漏斗插入熱萃取器；從頂部加入200mL 預(yù)先煮沸的硫酸溶液（0.128 0.005mol/L）和兩滴正辛醇，將加熱旋扭開(kāi)到最大位置，待溶液沸騰后，將旋扭調(diào)到合適位置，使溶液保持微沸30min，抽濾，用沸蒸餾水洗至中性，加入200mL 預(yù)先煮沸的氫氧化鈉溶液（0.313 0.005mol/L），同樣準(zhǔn)確微沸30min，抽濾，用沸蒸餾水洗至中性，將坩堝轉(zhuǎn)移至冷萃取器，加入25mL95%乙醇，抽干，將漏斗轉(zhuǎn)移至烘箱，于130 2℃下烘干2h，取出后在干燥器中冷卻至室溫，稱量。再放入500 25℃高溫爐中灼燒1h，干燥器中冷卻至室溫后稱量。型號(hào)不同的儀器具體操作步驟見(jiàn)該儀器使用說(shuō)明書(shū)。
八 結(jié)果計(jì)算
按下式計(jì)算粗纖維的質(zhì)量分?jǐn)?shù)：
粗纖維（%）=m1-m2/m
式中： m1──130℃烘干后坩堝及試樣殘?jiān)浚琯;
m2──550℃（或500℃）灼燒后坩堝及試樣殘?jiān)浚琯;
m──試樣（未脫脂）質(zhì)量，g。
9 精密度
每個(gè)試樣取兩平行樣進(jìn)行測(cè)定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。
粗纖維含量在10%以下，絕對(duì)值相差0.4。
粗纖維含量在10%以上，相對(duì)偏差為4%。
10 參考文獻(xiàn)
GB/T 6434-94 飼料中粗纖維測(cè)定方法。
